一种新型凋亡素融合蛋白的克隆表达及活性测定

• 作者: 刘建文 吕稼锋 王富军 肖伟 范立强 袁勤生 赵健
• 来源期刊: 食品与药品
• 学科: 生物学
• 关键词: EC-SOD3-凋亡蛋白 克隆表达 纯化 噻唑蓝法
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: Q591.2
• 字数: 3005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-979X.2009.04.003

摘要

目的 克隆表达EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,并检测其生物活性.方法 PCR扩增出apoptin序列,与表达载体EC-SOD3-pET-28a连接后在大肠杆菌B121(DE3)中经IPTG诱导,表达产物进行Ni2+-NTA纯化和MTT活性检测.结果 表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin经酶切鉴定和序列分析,证明质粒构建正确,转化E.coli BL21(DE3)后,重组蛋白获得表达,Ni2+-NTA纯化后的凋亡素融合蛋白纯度达到85%以上,经噻唑蓝(MTT)法测定具有活性.结论 成功构建了表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin,并在大肠杆菌中表达了EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,纯化的蛋白质具有诱导HeLa细胞凋亡的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建文	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	53	466	12.0	19.0
2	袁勤生	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	151	1535	22.0	29.0
3	赵健	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	58	146	4.0	9.0
4	范立强	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	37	149	7.0	11.0
5	肖伟	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	5	5	2.0	2.0