酶法制备壳寡糖及其生物学功能

• 作者: 吴东明 张涛 杨雨晗 王亮
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 医学
• 关键词: 壳寡糖 凋亡 蜗牛酶
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 28-34
• 分类号: R392.12
• 字数: 3246字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2010.03.006

摘要

用正交试验方法考察温度、酶浓度、pH对蜗牛酶降解壳聚糖的影响,筛选蜗牛酶降解壳聚糖的最佳反应条件,采用SDS-PAGE方法分析降解产物,制备具有生物学功能的壳寡糖.用不同浓度的壳寡糖处理人肝癌HepG2细胞,观察细胞形态学变化,MTT法检测壳寡糖对其增殖的影响,琼脂糖凝胶电泳检测DNA变化,流式细胞术检测凋亡率(AR).结果表明:蜗牛酶降解壳聚糖的产物主要是聚合度为4以上的寡糖,更多的接近壳六糖.最佳反应条件为pH 4.0、温度40 ℃、酶和底物质量比为4:50;壳寡糖质量浓度在2～4 mg/mL时,对HepG2细胞增殖有抑制效应,细胞经壳寡糖处理48 h后,开始空泡化,DNA出现明显的凋亡条带,AR明显高于对照组.在最佳反应条件下蜗牛酶能较好地降解壳聚糖,制备的壳寡糖在一定浓度范围内能通过诱导HepG2细胞发生凋亡而抑制其增殖,其作用呈浓度依赖性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张涛	成都医学院生物医学系	23	107	7.0	9.0
2	吴东明	成都医学院生物医学系	15	31	3.0	5.0
3	杨雨晗	成都医学院生物医学系	11	74	3.0	8.0
4	王亮	成都医学院生物医学系	2	15	2.0	2.0