中国麇鹿朊蛋白核心片段的原核克隆表达与纯化

• 作者: 刘玉亮 刘雨田 孙成友 胡国良 郭小泉
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: PrP蛋白 酶切 转化 诱导 纯化
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 25-27
• 分类号: S852.659.7
• 字数: 3338字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2010.11.015

摘要

从采取的新鲜麋鹿血液中提取麋鹿基因组DNA,通过PCR的方法从麋鹿基因组中扩增麋鹿PrP蛋白核心片段的DNA,并分别在引物的5'和3'端引入EcoR I和Hind Ⅲ两个酶切位点,下游引物将原序列TATTAC突变为TAATAA变成两个终止密码子.通过两个酶切位点将麋鹿PrP蛋白核心片段DNA连接到pET-32a(+),转化DH5α,通过酶切鉴定和PCR鉴定,筛选出阳性克隆送菌液测序,从测序结果分析阳性克隆是否符合要求.测序正确后将核心片段基因连接到pET-32a(+),阳性质粒命名为MPrP-pET-32a(+),阳性质粒转化E.coli BL21(DE3),进行诱导表达、蛋白质纯化鉴定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡国良		98	505	13.0	18.0
2	刘雨田		8	13	2.0	3.0
3	刘玉亮		2	2	1.0	1.0
7	郭小泉		1	2	1.0	1.0
8	孙成友		7	8	2.0	2.0