红冬孢酵母苯丙氨酸解氨酶基因pal在大肠杆菌中的克隆与表达

• 作者: 丁重阳 侯文婷 张梁 石贵阳 顾正华
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 反转录 重组表达
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 61-66
• 分类号: Q786
• 字数: 3683字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2012.05.012

摘要

以红冬孢酵母总RNA为模板反转录获得其苯丙氨酸解氨酶基因pal,测序与已公布蛋白序列进行比对,相似度为99％.并以含有T7强启动子的pET - 28a(+)为载体构建重组质粒pET - 28a(+)- pal,通过异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导实现苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的表达.对诱导条件进行初步优化后,重组茵PAL比酶活可达到42.99 U/g.转化实验中肉桂酸的转化率为48.52％,L-苯丙氨酸生成量为1.73 g/L.结果表明,红冬孢酵母pal基因通过表达载体pET - 28a(+)在E.coli中获得了高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁重阳	江南大学工业生物技术教育部重点实验室粮食发酵工艺与技术国家工程实验室	52	441	12.0	19.0
2	石贵阳	江南大学工业生物技术教育部重点实验室粮食发酵工艺与技术国家工程实验室	128	1034	17.0	24.0
3	张梁	江南大学工业生物技术教育部重点实验室粮食发酵工艺与技术国家工程实验室	86	530	12.0	16.0
4	顾正华	江南大学工业生物技术教育部重点实验室粮食发酵工艺与技术国家工程实验室	17	137	5.0	11.0
5	侯文婷	江南大学工业生物技术教育部重点实验室粮食发酵工艺与技术国家工程实验室	1	3	1.0	1.0