液化沙雷氏菌磷脂酶A1的克隆表达及乳糖自诱导发酵

• 作者: 丁重阳 延晋雷 张梁 石贵阳 顾正华
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 液化沙雷氏菌 磷脂酶A1 自诱导 分泌表达
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 生物育种与工艺优化
• 页码范围: 853-856
• 语种: 中文

摘要

为了利用大肠杆菌高效生产重组磷脂酶,克隆了液化沙雷氏菌磷脂酶A1的编码基因pla,分别使用pET-28a(+)和pET-20b(+)载体,实现了磷脂酶A1在大肠杆菌BL21(DE3)中的功能表达.重组菌利用载体pET-28a(+)在原始信号肽的介导下胞外PLA1酶活达40.8 U/mL,占总酶活的91％.重组菌转接至优化后的发酵诱导培养基:蛋白胨10 g/L,酵母粉5g/L,葡萄糖0.8 g/L,乳糖5 g/L,25 mmol/L Na2HPO4,25 mmol/L KH2PO4和1 mmol/L MgSO4;菌体生长6h后,添加7.5 g/L的甘氨酸,37℃恒温发酵24 h,重组菌胞外PLA1酶活达到128.7 U/mL.