人可溶性DC-SIGN的原核表达及鉴定

• 作者: 卢晓 张丽芸 张婧 陈政良
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DC-SIGN 可溶性形式 胞外区 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 701-703,707
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

目的 构建可溶性DC-SIGN(sDC-SIGN)原核表达载体,获得不含标签蛋白的sDC-SIGN蛋白.方法 采用PCR方法,从含人DC-SIGN cDNA的重组质粒pGM-DC-SIGN扩增DC-SIGN胞外区基因片段,插入原核表达载体pET17b,构建重组表达载体pET17b-sDC-SIGN,经酶切图谱和测序鉴定,转入E.coli BL21 (DE3)诱导表达蛋白,用抗人DC-SIGN抗体-Sepharose 4B亲和层系纯化表达产物,以SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 从重组质粒pGM-DC-SIGN扩增获得1 300 bp目的基因片段,构建重组表达质粒pET17b-sDC-SIGN,其酶切图谱和序列与预期相符.纯化表达产物sDC-SIGN,鉴定其分子质量为38 000,Western bolt证明其可与抗人DC-SIGN抗体特异性结合.结论 获得了能高效表达重组人sDC-SIGN的大肠杆菌菌株和不带任何标签蛋白的sDC-SIGN蛋白,为深入研究sDC-SIGN的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丽芸	南方医科大学基础医学院免疫学教研室	39	195	8.0	11.0
2	陈政良	南方医科大学基础医学院免疫学教研室	68	338	10.0	13.0
3	卢晓	南方医科大学基础医学院免疫学教研室	31	116	6.0	9.0
4	张婧	南方医科大学基础医学院免疫学教研室	28	135	7.0	9.0