壳聚糖螯合凝胶层析法纯化血液超氧化物歧化酶

• 作者: 平娟 庞晓斌 张永州 李昭华 李梅基 王保全 董先智 黄继海
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 工学
• 关键词: 相对分子质量 聚丙烯酸钠 血液 超氧化物歧化酶
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 248-254
• 页数: 7页
• 分类号: TQ464.8
• 字数: 4456字
• 语种: 中文

摘要

首先利用不同相对分子质量聚丙烯酸钠从动物血液中分离纯化出超氧化物歧化酶(SOD),探索不同相对分子质量聚丙烯酸钠对SOD提取酶活性的影响.鉴于离子交换层析和凝胶过滤层析纯化时所用材料较昂贵,探索出一条适合工业化大规模生产的纯化方法.利用壳聚糖、亚氨基二乙酸(IDA)和环氧氯丙烷等材料合成一种新填料,根据亲和层析原理去除杂蛋白质,获得电泳纯级超氧化物歧化酶,使酶活性进一步提高,并和离子交换层析和凝胶过滤层析方法相对照,以期自制填料能代替Sephedex,DEAE-sepherose-fast flow等传统昂贵填料,以适合工业化生产.结果显示,低相对分子质量聚丙烯酸钠在血液SOD提纯工艺中更为适用,超滤后的粗酶液经离子交换层析、凝胶过滤层析和壳聚糖亲和层析纯化后经SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳后呈明显的单一条带,单亚基分子量16 kD,比活力达5 585 U/mg和6 148 U/mg,4 739 U/mg;产品得率分别为18.1％和13.7％,15.5％;纯化后活性回收率分别为61.2％,50.8％,42.6％.表明壳聚糖亲和层析方法在新工艺后续纯化工艺中有望代替Sephedex DEAEsepherose-fast flow为基础的传统纯化方法,适合工业化大规模生产.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张永州	河南大学淮河临床学院	46	262	9.0	13.0
2	庞晓斌	河南大学药学院	39	129	7.0	9.0
3	李昭华	中国科学院生物物理研究所	6	38	3.0	6.0
4	黄继海	河南大学淮河临床学院	4	3	1.0	1.0
5	董先智	中国科学院生物物理研究所	6	36	3.0	6.0
6	平娟	河南大学淮河临床学院	8	23	3.0	4.0
7	王保全	河南大学淮河临床学院	12	50	4.0	6.0
8	李梅基	兰州大学生物工程学院	1	1	1.0	1.0