痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶的克隆表达及酶学性质研究

• 作者: 李迅 王飞 顾华祥
• 来源期刊: 南京林业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 痤疮丙酸杆菌 亚油酸异构酶 共轭亚油酸 酶学性质
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 105-109
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3396字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.2014.06.020

摘要

为了研究使用生物酶法制备共轭亚油酸的可行性，笔者对痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶进行了异源表达和理化性质研究。根据大肠杆菌偏好密码子，优化了来源于痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶（ PAI）的基因（ pai），将克隆的基因在BL21（ DE3）中进行表达，纯化目的蛋白，获得重组PAI蛋白。 SDS－PAGE结果显示，重组PAI分子质量为48 ku，重组蛋白主要以包涵体沉淀的形式存在。经测定重组PAI在35℃、pH 7．0时酶活最高，比酶活为752．3μmol/（ min·mg）。经35℃保温2 h，酶活保持90％以上，pH为6．5～7．0时，PAI具有较好的稳定性，Mn2＋和Zn2＋对酶活力分别有22．4％和15．8％的抑制作用，以亚油酸为底物时该酶的Km 值为1．13 mmol/L， kcat为4．67 s－1。相关分析表明，痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶性质优良，适合以亚油酸为底物生物催化制备共轭亚油酸。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王飞	南京林业大学化学工程学院江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室	45	244	10.0	13.0
2	李迅	南京林业大学化学工程学院江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室	25	149	6.0	11.0
3	顾华祥	南京林业大学化学工程学院江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室	1	1	1.0	1.0