多功能淀粉酶固定化中的底物保护效应

• 作者: 夏莹 张应玖 曹昊
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 多功能淀粉酶 壳聚糖 固定化 底物 凝胶微球
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 330-335
• 页数: 6页
• 分类号: O643.32
• 字数: 5797字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20140767

摘要

以壳聚糖为载体,通过正交实验确定了用壳聚糖凝胶微球固定多功能淀粉酶OPMA-N的最适条件：以20 mg/mL戊二醛交联,在25℃及pH=6.5条件下固定1.5 h,但需在引入底物淀粉介导的保护效应后,才能获得良好稳定性的固定化OPMA-N( IOPMA-N),显示了底物保护效应在催化部位占分子中较大区域的酶(如OPMA-N)固定化过程中的重要性.对比分析游离酶与固定化酶的性质与功能发现,在50℃及pH=6.0~7.0条件下, IOPMA-N的表观比活力比游离酶OPMA-N提高3倍以上,催化效率( kcat/Km )提高4倍以上,对弱酸性至中性及常温(30~50℃)环境的耐受性明显高于OPMA-N,并具有良好的操作稳定性和储存稳定性,重复使用15次后,酶活力仍然能够保持75%,在4℃下储存半衰期达31 d,而OPMA-N在4℃下储存5 d后活力基本丧失.催化产物的对比分析结果表明, OPMA-N固定化后,水解活性明显提高,但同时转苷活性有所下降,这与已报道的OPMA-N分子中2种催化活力存在平衡机制的结论一致,同时也表明在OPMA-N的固定化中底物淀粉对其水解活性有明显的保护作用,但对其转苷活性几乎无贡献.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张应玖	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	44	194	7.0	11.0
3	夏莹	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	2	0	0.0	0.0
4	曹昊	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	2	4	1.0	2.0