四川泡菜中植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因克隆与表达

• 作者: 侯晓艳 罗惟 董维 蒲彪 陈安均 韩国全
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 亚硝酸盐还原酶 克隆 基因表达 植物乳杆菌
• 年，卷（期）: 2015,（15）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 143-147
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2015.15.022

摘要

目的:对植物乳杆菌中亚硝酸盐还原酶基因进行克隆并表达,并测定酶的活力.方法:根据GenBank中亚硝酸盐还原酶(NIR)基因序列,设计引物.提取植物乳杆菌的DNA,采用PCR技术扩增nir基因,TA克隆构建获得重组质粒pMD19-nir,分析其核苷酸序列同源性.通过双酶切连接到表达载体pET-32a(+)中,获得重组表达载体pET-32a-nir,构建成功后转化到E.coli BL(DE3)中进行表达研究.经IPTG诱导表达,得重组蛋白,超声波破碎,提取粗酶液,测定酶活力.结果:克隆的目的基因序列长度为1638 bp.获得重组蛋白分子量为80 ku,酶活力为4.2 U/mg.结论:成功克隆了植物乳杆菌中的亚硝酸盐还原酶基因,成功的导入到E.coli BL(DE3)中,表达产物有酶活.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈安均	四川农业大学食品学院	109	622	15.0	20.0
2	韩国全	四川农业大学食品学院	57	199	7.0	10.0
3	蒲彪	四川农业大学食品学院	164	1749	22.0	29.0
4	侯晓艳	四川农业大学食品学院	13	27	3.0	5.0
5	董维	四川农业大学食品学院	4	23	3.0	4.0
6	罗惟	四川农业大学食品学院	4	23	3.0	4.0