一种米曲霉蛋白酶的分离纯化及酶解特性研究

• 作者: 冯倩 冯颖杰 孙进 宗红 方慧英 楼笑笑 程英雀 诸葛斌 陆信曜
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 米曲霉 蛋白酶 分离纯化 酶切位点
• 年，卷（期）: 2015,（20）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 210-213,219
• 分类号: TS201.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2015.20.036

摘要

对米曲霉固态发酵所产蛋白酶分离纯化,采用硫酸铵盐析、DEAE-FF层析、Butyl-HP层析和Superdux 7510/300GL凝胶层析得到一种电泳纯的蛋白酶,SDS-PAGE显示分子量大小为27 ku左右.以酪蛋白为底物时,该蛋白酶Km=1.23 g·L-1,Vm=27.03 μg·mL-1· min-1,最适反应条件为50℃,pH9.0.该蛋白酶对酪蛋白水解活性最高,而对牛血清蛋白的水解活性很低;对牛胰岛素B链上-Phe-Val-,-Cys-Gly-,-Glu-Ala-和-Arg-Gly-组成的肽键有较强的切割能力,酶切位点较多,对疏水性氨基酸具有较高的选择性,为米曲霉所产蛋白酶在食品上的应用提供有力的参考.