新型环氧化物水解酶AuEH1的表达及酶学性质

• 作者: 康雁君 李兴倩 李雪婷 胡蝶 邬敏辰 黄博梅
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 宇佐美曲霉 环氧化物水解酶 表达 酶学性质 对映选择性 (S)-环氧苯乙烷
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1157-1162
• 页数: 6页
• 分类号: Q556
• 字数: 4134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2017.11.006

摘要

采用RT-PCR技术从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001总RNA中扩增了一种新型环氧化物水解酶AuEH1的编码基因Aueh1.将该基因与表达质粒pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3),获基因工程菌E.coli/Aueh1,IPTG诱导表达重组AuEH1(reAuEH1).菌体经超声波破碎,收集上清作为reAuEH1酶液.分析结果表明,reAuEH1活性为8.12 U/mL;其最适温度为40℃,在40 ℃及以下稳定;最适pH为6.5,在pH 5～9范围内稳定;所测金属离子(除Ag+和Cu2+外)及EDTA对reAuEH1活性影响不大.在40 mmol/L磷酸钾缓冲液(pH 6.5)、20 mmol/L外消旋环氧苯乙烷((R,S)-SO)和0.8 U/mL reAuEH1体系(终体积6 mL)中,35℃反应50 min,所获手性产物(S)-SO的摩尔产率为30.8％、对映体过量(e.e.)值＞99％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬敏辰	江南大学无锡医学院	163	1504	22.0	29.0
2	胡蝶	江南大学生物工程学院	20	38	3.0	5.0
3	康雁君	江南大学无锡医学院	5	4	1.0	2.0
4	李兴倩	江南大学药学院	1	1	1.0	1.0
5	黄博梅	江南大学无锡医学院	1	1	1.0	1.0
6	李雪婷	江南大学无锡医学院	2	4	1.0	2.0