多黏芽孢杆菌产α-环糊精葡萄糖基转移酶在大肠杆菌中的可溶性表达及其转化产物特异性研究

• 作者: 万一 李皎 杨国武 王军 王琰 邓媛
• 来源期刊: 中国食品添加剂
• 学科: 生物学
• 关键词: α-环糊精葡萄糖基转移酶 可溶性表达 纯化 转化性质
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 81-86
• 页数: 6页
• 分类号: Q555
• 字数: 3703字
• 语种: 中文

摘要

通过设计简并引物,从Paenibacillus macerans YLW菌株中克隆到其α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGTase)基因,构建重组质粒α-CGTase-pET28a(+),转化大肠杆菌BL21 (DE3),得到重组菌株α-CGTase-pET28a/BL21 (DE3).在16℃,1mM IPTG条件下诱导15 h,实现了α-CGTase的可溶性表达,胞内酶活达到10046U/mL,是野生菌株胞外酶活的3.25倍.经镍柱一步法亲和纯化α-CGTase后,酶蛋白纯化了6.05倍,酶收率28.82％,通过SDS-PAGE检测获得表观电泳纯酶蛋白.酶催化转化实验表明:重组α-CGTase酶转化质量分数为5％的马铃薯淀粉15 h后,环糊精的总转化率可达40.7％,转化生成α-CD,ββ-CD,γ-CD比例分别为:43.6％、41.8％和14.6％.该重组酶对α-CD具有较好的转化专一性,通过转化条件的进一步优化将具有非常好的产业化开发前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王琰		17	61	4.0	6.0
2	万一		37	127	7.0	10.0
3	邓媛		31	81	5.0	7.0
4	杨国武		22	176	5.0	13.0
5	李皎		24	94	5.0	8.0
6	王军		15	29	3.0	4.0