油茶花青素还原酶基因克隆和体外功能研究

• 作者: 何周 吴信洁 姚芳 宛晓春 李龙宝 杨华 陈子怡 黄贝
• 来源期刊: 茶业通报
• 学科: 农学
• 关键词: 油茶 儿茶素 花青素还原酶基因 克隆和表达 酶活检测
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 茶树育种
• 页码范围: 71-76
• 页数: 6页
• 分类号: S571.1
• 字数: 3460字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5768.2018.02.007

摘要

花青素还原酶(ANR)是催化花青素还原形成单体儿茶素的关键酶.油茶(CamelliaoleiferaAbel.)属于山茶科山茶属植物,其花青素还原酶基因尚未被克隆和功能分析.本研究采用RT-PCR技术,克隆获得了两条油茶花青素还原酶基因的全长序列,CoANR1基因全长1441bp,开放阅读框(ORF)长度为1047bp,编码348个氨基酸残基,与茶树ANR1基因的蛋白序列同源性为97％;CoANR2基因全长1413bp,ORF框长度为1014bp,编码337个氨基酸残基,与茶树ANR2基因的蛋白序列同源性为99％.采用大肠杆菌表达方法获得CoANR1和CoANR2重组蛋白,纯化蛋白经体外酶活检测能够催化矢车菊色素合成儿茶素(C)和表儿茶素(EC),催化飞燕草色素合成没食子儿茶素(GC)和没食子表儿茶素(EGC).本研究为进一步研究油茶儿茶素合成的分子机制提供了重要的研究基础和理论依据.