多序列比对在克隆表达一株未知芽孢杆菌角蛋白酶基因中的应用

• 作者: 蒋少龙 蔡俊 郭依依
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 多序列比对 角蛋白酶 芽孢杆菌 简并引物
• 年，卷（期）: 2019,（24）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 74-81,87
• 页数: 9页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 6627字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.24.013

摘要

为克隆表达一株未知芽孢杆菌的角蛋白酶基因,本文对芽孢杆菌属来源的13个角蛋白酶基因进行了分类比对,并设计简并引物,成功筛选出一株未知芽孢杆菌的角蛋白酶基因,在大肠杆菌中克隆表达,最后通过SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)分析和酶活测定验证表达成功,同时还确立重组大肠杆菌BI21(pET-28a-Ker)的最佳诱导温度为20℃,经过0.5 mmol/L IPTG(isopropylthio-galactoside)诱导16 h后,粗酶液中的角蛋白酶酶活达到389.7 U/mL.本文证明了通过多序列比对而设计的角蛋白酶简并引物的有效性,且该方法能够简化角蛋白酶的研究和开发.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡俊		3	7	2.0	2.0
2	蒋少龙		1	0	0.0	0.0
3	郭依依		1	0	0.0	0.0