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摘要:
为克隆表达一株未知芽孢杆菌的角蛋白酶基因,本文对芽孢杆菌属来源的13个角蛋白酶基因进行了分类比对,并设计简并引物,成功筛选出一株未知芽孢杆菌的角蛋白酶基因,在大肠杆菌中克隆表达,最后通过SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)分析和酶活测定验证表达成功,同时还确立重组大肠杆菌BI21(pET-28a-Ker)的最佳诱导温度为20℃,经过0.5 mmol/L IPTG(isopropylthio-galactoside)诱导16 h后,粗酶液中的角蛋白酶酶活达到389.7 U/mL.本文证明了通过多序列比对而设计的角蛋白酶简并引物的有效性,且该方法能够简化角蛋白酶的研究和开发.
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文献信息
篇名 多序列比对在克隆表达一株未知芽孢杆菌角蛋白酶基因中的应用
来源期刊 食品工业科技 学科 工学
关键词 多序列比对 角蛋白酶 芽孢杆菌 简并引物
年,卷(期) 2019,(24) 所属期刊栏目 生物工程
研究方向 页码范围 74-81,87
页数 9页 分类号 TS201.3
字数 6627字 语种 中文
DOI 10.13386/j.issn1002-0306.2019.24.013
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 蔡俊 3 7 2.0 2.0
2 蒋少龙 1 0 0.0 0.0
3 郭依依 1 0 0.0 0.0
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食品工业科技
半月刊
1002-0306
11-1759/TS
大16开
北京永外沙子口路70号
2-399
1979
chi
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200094
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