多聚半乳糖醛酸酶在黑曲霉中的超量表达及其酶学性质研究

• 作者: 刘思琪 吕珍立 张会 徐冰怡 李学静 李杰 石杨
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 黑曲霉 多聚半乳糖醛酸酶 超量表达 酶学性质 重组菌株 基因工程
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 80-85
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 5195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.04.015

摘要

运用基因工程手段,构建高效表达多聚半乳糖醛酸酶的黑曲霉重组菌株,并对重组酶活性及酶学性质进行研究,以期更好的实现多聚半乳糖醛酸酶在食品加工、饲料生产及废水处理中的重要作用.从果胶酶生产菌黑曲霉GJ-1中扩增得到多聚半乳糖醛酸酶基因pgaB的成熟肽编码序列(1232 bp),集成glaA多拷贝强启动子和信号肽,构建其黑曲霉表达载体pSZHG6RS-pgaB,通过农杆菌介导法转化黑曲霉,获得多聚半乳糖醛酸酶黑曲霉重组菌株.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测结果表明,目的蛋白大小约为38 kDa;在发酵第10 d时酶活最高达到4617.8 U·mL-1 .酶学性质研究表明,最适温度为50 ℃,高温时热稳定性较差;最适pH为5.0,碱性耐受能力较强;Ca2+、Fe3+、Fe2+均对重组酶有一定激活作用;重组酶对不同底物的催化能力不同,甲酯化程度越高酶对其降解能力越弱,其中对无甲酯化的多聚半乳糖醛酸催化能力最强,DE值为33.04% .重组菌株产酶活性较高,具有明确的产业化前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李杰	东北农业大学生命科学学院	193	1723	20.0	30.0
2	张会	东北农业大学生命科学学院	9	42	3.0	6.0
3	石杨	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	吕珍立	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
5	刘思琪	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
6	徐冰怡	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
7	李学静	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0