N末端结构模块缺失对嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰多糖水解酶TK-PUL酶学性质的影响

• 作者: 曾静 何础阔 郭建军 袁林
• 来源期刊: 食品科学
• 关键词: Ⅲ型普鲁兰多糖水解酶 N末端结构模块 缺失突变 催化特性
• 年，卷（期）: 2021,（10）
• 所属期刊栏目: 生物工程|Bioengineering
• 页码范围: 201-208
• 页数: 8页
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20200408-099

摘要

通过对嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰多糖水解酶TK-PUL进行N末端截短突变,并比较TK-PUL与突变酶的酶学性质,确定N末端结构模块的缺失对酶学性质的影响.结构模块N1的缺失改良了TK-PUL的催化特性,其α-淀粉酶比活力提高至TK-PUL的1.11倍,普鲁兰酶比活力提高至TK-PUL的1.12倍,于100?℃的半衰期延长至TK-PUL的1.15倍.结构模块N2的缺失提高了酶的热稳定性,于100?℃的半衰期延长至TK-PUL的1.25倍.但是结构域N2的缺失降低了酶的pH值稳定性、酶的底物结合能力以及比活力.并且结构域N2影响了酶的底物选择性,导致其α-淀粉酶活性与普鲁兰酶活性的比值由0.49提高至0.60.结果表明,TK-PUL的N末端结构模块N1和N2均不是其发挥催化活性所必需的结构区域,但是对酶的底物结合能力、底物降解能力以及稳定性具有重要影响.