猪细小病毒VP2基因的克隆、测序与原核表达

• 作者: 吕建强 周复春 肖少波 赵俊龙 陈焕春
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 VP2基因 基因克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 页码范围: 195-198
• 页数: 4页
• 分类号: S858.31
• 字数: 3001字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2003.02.017

摘要

利用PCR技术从猪细小病毒的RF DNA模板中扩增了含有VP2全基因的2.0 kb的基因片段,将PCR产物克隆至pMD18-T载体,利用双脱氧末端终止法测定了VP2全基因的核苷酸序列.将所得的核苷酸序列和推导的氨基酸序列分别与GenBank中的相应序列进行同源性比较,同源性均在99%以上,从而说明该蛋白的碱基序列和氨基酸序列均具有高度的保守性.将VP2全基因分别克隆入原核表达载体pET15(b)、pET17(b)和pET28(b)构建成表达质粒pET15bVP2、pET17bVP2和pET28bVP2;将含有VP2基因起始位点至EcoRⅠ切点间的0.8 kb片段克隆入pET17(b)中构建成表达质粒pET17bVP2f.利用上述四种质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导后SDS-PAGE检测表达情况,结果发现pET17bVP2f质粒在45 kD处有一特异性表达带,而其它几种质粒均未看到特异性表达带,推测VP2基因3′端的某些结构可能对VP2全基因的表达有一定影响.这一结果对研究VP2基因的结构与功能具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学畜牧兽医学院病毒室	331	4866	36.0	53.0
2	肖少波	华中农业大学畜牧兽医学院病毒室	79	1105	19.0	30.0
3	赵俊龙	华中农业大学畜牧兽医学院病毒室	62	644	13.0	23.0
4	周复春	华中农业大学畜牧兽医学院病毒室	10	317	8.0	10.0
5	吕建强	华中农业大学畜牧兽医学院病毒室	14	420	12.0	14.0