定向进化技术改良β-糖苷酶的低聚糖合成性能

• 作者: 仪宏 冯惠勇 王丽丽
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 定向进化 β-糖苷酶 低聚糖 转糖基反应 水解反应
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 44-49
• 页数: 6页
• 分类号: Q51
• 字数: 3885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2006.01.010

摘要

对携带糖苷酶基因pBBGly的质粒pBtac2进行易错PCR定向进行研究,以改良其合成低聚糖催化性能.来源于Thermus thermophilus的耐高温β-糖苷酶,通过一轮易错PCR随机突变和限制性酶切再连接介导的体外基因重组,获得了两株高转糖基活性的突变酶:N339TF401S和F401S.它们能以天然糖类为糖基受体,低聚糖的合成得率分别为48%和62%,是野生型酶的6～8倍,而底物的水解活力只有野生型酶的0.08%和1.3%.另外,在突变酶的酶反应中,糖基受体对供体的水解反应有显著的促进作用,而野生型酶没有此特征.并且它们的催化水解动力学特征也明显区别于野生酶,水解反应初始浓度对速度关系呈一条直线.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽丽	河北科技大学生物科学与工程学院	108	517	11.0	20.0
2	冯惠勇	河北科技大学生物科学与工程学院	26	260	10.0	15.0
3	仪宏	河北科技大学生物科学与工程学院	39	552	13.0	22.0