新型碱性低分子量β-葡萄糖苷酶基因的分离与酶学性质研究

• 作者: 周泽扬 唐婧 张时恒 李田 贾俊杰 马振刚 马淑华
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 宏基因组 文库 新型β-葡萄糖苷酶 低分子量 酶学性质
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究与探讨
• 页码范围: 108-113
• 分类号: TS201.25
• 语种: 中文

摘要

目的：获得新型β-葡萄糖苷酶编码基因,并对其表达产物进行酶学性质研究。方法：采用宏基因组学方法提取兔盲肠内微生物总DNA,构建DNA文库,通过筛选培养基获得产β-葡萄糖苷酶的克隆,测序获得其插入基因序列,氨基酸多重序列比对分析其序列特征,并用DNS显色法测定表达产物在不同条件下的酶活力。结果：在文库中获得一个基因片段nglu07,能编码一个低分子量的β-葡萄糖苷酶。nglu07基因片段长180bp,编码60个氨基酸残基。与已提交的糖苷水解酶Ⅰ家族成员进行氨基酸多重序列比对表明nglu07具有预测的活性位点Glu4与底物结合位点Tyr47,其最适反应温度为50℃,最适pH为10.0,粗酶活为8.12U/mL。结论：成功获得一新型低分子量的碱性β-葡萄糖苷酶编码基因,其蛋白温度稳定性高,在pH4.0～11.0的环境中均能保持较高的酶活力,具有作为食品工业用酶以及碱性酶的潜力,尤其在食品饮料加工、棉织品生物整理、洗涤及废纸脱墨等工业方面具有一定的应用价值。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李田	西南大学农业部蚕桑学重点实验室	26	114	6.0	10.0
2	马振刚	西南大学农业部蚕桑学重点实验室	8	26	3.0	4.0
3	贾俊杰	西南大学农业部蚕桑学重点实验室	4	13	2.0	3.0
4	马淑华	西南大学农业部蚕桑学重点实验室	3	28	2.0	3.0
5	张时恒	西南大学农业部蚕桑学重点实验室	2	10	2.0	2.0