葡萄糖氧化酶基因在黑曲霉中的分泌表达

• 作者: 张谷楠 李杰 李硕然 汪天虹 钟耀华 韩建春
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 葡萄糖氧化酶 黑曲霉 转化 分泌表达
• 年，卷（期）: 2012,（18）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 209-213
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

通过PCR扩增从一株葡萄糖氧化酶生产菌黑曲霉中克隆得到1818bp葡萄糖氧化酶基因GOD,将GOD基因与糖化酶基因的5’同源臂、3’同源臂进行重叠延伸,构建葡萄糖氧化酶基因的表达框。将此表达框插入载体pSZH中,构建黑曲霉同源重组表达载体pSZH-GOD。将载体pSZH-GOD通过冻融法转化农杆菌AGL1,进而通过农杆菌介导法转化高产糖化酶的黑曲霉。经潮霉素筛选和PCR鉴定获得8株重组菌株。对8株重组菌株的发酵液上清液进行酶活测定,结果表明葡萄糖氧化酶基因在高产糖化酶的黑曲霉中得到了分泌表达,静置培养6d后其分泌表达的葡萄糖氧化酶酶活最高可达1.166U/mL,而在出发菌株中检测不到葡萄糖氧化酶的分泌表达。同时,重组菌株胞内表达的葡萄糖氧化酶最高酶活可达11.45U/mL,是出发菌株的266倍。此研究结果为简化葡萄糖氧化酶发酵生产工艺、提高酶产量提供了新的途径。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李杰	东北农业大学生命科学学院	193	1723	20.0	30.0
2	韩建春	东北农业大学食品学院	107	675	12.0	18.0
3	汪天虹	山东大学生命科学学院	40	924	15.0	30.0
4	钟耀华	山东大学生命科学学院	9	72	5.0	8.0
5	李硕然	东北农业大学生命科学学院	2	6	2.0	2.0
6	张谷楠	东北农业大学生命科学学院	2	6	2.0	2.0