甜菜 SSR －PCR 反应体系优化及基于 DNA 混合池的 SSR 引物快速筛选

• 作者: 刘乃新 吴玉梅 张福顺
• 来源期刊: 中国甜菜糖业
• 学科: 农学
• 关键词: 甜菜 SSR-PCR反应体系优化 引物筛选 基因组DNA混合池
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: S566.3
• 字数: 1983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3639/j.issn.1002-0551.2014.04.0005

摘要

应用L16（44）正交设计对影响甜菜SSR－PCR的主要参数进行优化，建立适于甜菜的SSR反应体系和扩增程序。20ul反应体系中含有模板70ngDNA，150umol／L dNTP，0．7umol／L SSR引物，0．5Taq DNA聚合酶／U，10×PCR Buffer（含Mg2＋）2．0ul。以选择的87对SSR引物为对象，对10个甜菜基因组DNA样品等量混合，进行PCR扩增筛选引物，结果表明，与常规筛选方法相比，DNA混合池方法大幅度缩短了实验周期，显著减少了实验资源的消耗，可用于大量甜菜SSR引物的快速高效筛选。