免疫磁捕获-荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌

• 作者: 吴清平 张菊梅 李海刚 杨小鹃 蔡淑珍 陈玲
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 免疫磁珠分离 荧光定量PCR 沙门氏菌
• 年，卷（期）: 2014,（24）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 79-83
• 分类号: TS201.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2014.24.008

摘要

建立了免疫磁珠分离(Immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(Real-time PCR)技术准确、快速检测食品中沙门氏菌(Salmonella spp)的方法.采用亲和纯化的羊抗沙门氏菌抗体与DynabeadsM-280磁珠制备沙门氏菌免疫磁珠,优化反应条件,建立免疫磁珠分离方法.同时根据沙门氏菌特异性ttr基因,建立Real-time PCR体系,并检测其特异性及敏感性.结果显示,沙门氏菌可产生荧光信号,而其他细菌均未见明显荧光信号.利用所建立的免疫磁捕获-荧光定量PCR(IMS-real-time PCR)方法可以检测初始含菌量最低为6.5CFU/25g的食品样品,全过程需时约8h.150份实际食品样品中,IMS-real-time PCR方法检出27份阳性样品,免疫磁珠联合XLT4平板培养法检出18份阳性样品,传统国标法检出14份阳性样品.