白鲢鱼背侧肌焦磷酸酶的纯化及酶学特性

• 作者: 刘玮 周黎 张雅玮 彭增起 徐萌 王复龙 马志方
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 焦磷酸酶 纯化 酶学特性 背侧肌 白鲢鱼
• 年，卷（期）: 2016,（13）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 130-135
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.2
• 字数: 5882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201613023

摘要

通过粗分离、50%～80%饱和度硫酸铵分级沉降、DE-52阴离子交换柱层析等步骤，从白鲢鱼背侧肌中分离纯化出焦磷酸酶。通过变性凝胶电泳分析，该酶在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱中仅有一个分子质量为40 kD的条带。酶学特性研究表明，白鲢鱼背侧肌焦磷酸酶可专一性地水解焦磷酸盐，反应初速率时间范围为0～15 min，最适反应温度为45℃，最适反应pH值为7.5。Mg2＋对该酶有明显的激活作用，在Mg2＋浓度为5 mmol/L时酶活力最高。5 mmol/L的Ca2＋、Zn2＋、乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA）-Na2、EDTA-Na4、KIO3和1 mmol/L的NaF均对该酶有强烈的抑制作用。该酶水解焦磷酸四钠的最大反应速率为0.051 U/mg，米氏常数为0.54 mmol/L。