重组嗜热乳糖酶在毕赤酵母中的表达、纯化与活性分析

• 作者: 吴东海 张树琴 李洪波 罗海燕
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜热乳糖酶 激烈热球菌 毕赤酵母 分泌表达 纯化
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 812-816
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3108字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2018.08.005

摘要

为获得耐高温的重组乳糖酶,PCR扩增激烈热球菌(Pyrococcus furious)乳糖酶基因、构建毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA/Lac并转化毕赤酵母X-33菌株.重组酵母转化子经甲醇诱导,重组嗜热乳糖酶实现了分泌表达并经蛋白印迹验证.纯化前上清液中乳糖酶总活力高达125 U/mL,经镍亲合纯化得重组酶,SDS-PAGE显示其纯度在95％以上,比活力1 800 U/mg,该酶最适温度在105 ℃C左右且热稳定性好,具有很强的水解乳糖能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴东海	中国科学院广州生物医药与健康研究院	8	9	2.0	2.0