黑曲霉高效敲除体系构建及tpsA基因的敲除

• 作者: 刘玲 张岚 张鸿飞 王德培 秦郦
• 来源期刊: 食品研究与开发
• 关键词: 黑曲霉 基因敲除 致死基因 5-氟脱氧尿苷 海藻糖-6-磷酸合成酶
• 年，卷（期）: 2018,（22）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 124-130
• 页数: 7页
• 字数: 4537字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-6521.2018.22.021

摘要

为完善高效的黑曲霉工程菌10142基因敲除体系,提高其基因敲除效率,构建含有致死基因单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSVtk)的基因敲除质粒,通过农杆菌介导的黑曲霉转化(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation,ATMT)法,使致死基因随机插入黑曲霉基因组,其阳性转化子在添加10μmol/L的5-氟脱氧尿苷的培养基上无法生长,从而得到致死基因随机插入转化子的"反向筛选"方法.利用该方法对黑曲霉海藻糖-6-磷酸合成酶进行基因敲除,结果表明阳性转子占总转化子的比例为63％.成功构建高效黑曲霉基因敲除体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦郦		3	0	0.0	0.0
3	刘玲		1	0	0.0	0.0
7	张鸿飞		1	0	0.0	0.0
11	张岚		2	5	1.0	2.0