蜡样芽孢杆菌LJ01中亚硝酸盐还原酶的基因克隆和生物信息学分析

• 作者: 刘冬梅 彭鑫 胡金双 赵珊 邝嘉华 陈思敏 黄燕燕
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 蜡样芽孢杆菌 亚硝酸盐还原酶 基因克隆 异源表达 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 94-98,105
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 4170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.06.016

摘要

为研究蜡样芽孢杆菌LJ01(Bacillus cereus LJ01)中亚硝酸盐还原酶(NiR)的酶学性质,获得高表达量的基因工程菌,本文对B.cereus LJ01的NiR序列进行了生物信息学分析,并将NiR基因克隆到表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+)中,构建了基因工程菌pET-28a(+)-nir-BL21和pET-32a(+)-nir-BL21,随后探究了不同诱导条件对重组NiR表达量的影响.结果表明NiR编码蛋白的理论分子量约为60 kDa,理论pI为5.47,二级结构主要为α-螺旋和无规则卷曲,是不具有跨膜结构的亲水性蛋白.随着诱导温度的升高,重组NiR的表达量逐渐减少,诱导温度为16℃时重组NiR表达量最高.在同一诱导温度下,NiR在pET-28a(+)-nir-BL21中的表达量明显高于pET-32a(+)-nir-BL21,因此选用pET-28a(+)-nir-BL21作为基因工程菌.从B.cereus LJ01中克隆了NiR基因,构建了基因工程菌pET-28a(+)-nir-BL21,为该重组NiR的理化性质研究和食源芽孢杆菌中NiR的异源表达奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘冬梅	华南理工大学食品科学与工程学院	80	909	14.0	28.0
2	陈思敏	华南理工大学食品科学与工程学院	11	14	3.0	3.0
3	胡金双	华南理工大学食品科学与工程学院	3	0	0.0	0.0
4	黄燕燕	华南理工大学食品科学与工程学院	12	20	2.0	4.0
5	邝嘉华	华南理工大学食品科学与工程学院	2	0	0.0	0.0
6	赵珊	华南理工大学食品科学与工程学院	9	7	1.0	2.0
7	彭鑫	华南理工大学食品科学与工程学院	3	3	1.0	1.0