同时利用AOX1和GAP启动子表达SAM合成酶促进重组毕赤酵母中S-腺苷甲硫氨酸积累

• 作者: 储炬 吕中原 庄英萍 张嗣良 王永红 郭美锦 钱江潮
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 生物学
• 关键词: 双表达单元 SAM合成酶 Pichia pastoris
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 24-30
• 页数: 7页
• 分类号: Q93
• 字数: 4932字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2008.04.005

摘要

利用重组毕赤酵母(Richia pastoris)强化表达S-腺苷甲硫氨酸(S-adenvylmethionine,SAM)合成酶(SAM synthetase,SAMS),发酵生产SAM时,胞内SAMS活性和ATP水平是影响SAM合成的重要因素.为了同时保持较高的SAMS活性和ATP供应,我们构建了一株既含有AOX1诱导型表达单元,又含有GAP组成型表达单元的双SAMS表达单元P.pastoris重组菌株Gd.它既能受甲醇调控表达SAMS,又能以甘油为碳源表达SAMS.在培养过程中,先是以甲醇诱导SAMS表达,得到较高的酶活,然后在发酵中后期再将碳源换为甘油.这样不但可以维持较高的酶活,而且可以提高胞内ATP含量.实验结果显示,对于同时利用AOX1和GAP启动子表达SAMS的重组菌,可采取甲醇和甘油两阶段补料,该重组菌的SAMS比产率高于组成型重组茵Xg,Gd进入甘油补料期后胞内ATP含量高于诱导型重组菌Ga.双表达单元菌株Gd的SAM产量达到1.41 g/L,比诱导型表达SAMS的重组菌株提高了76.3%,比组成型表达SAMS的重组菌株提高了60.2%,.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭美锦	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	69	606	14.0	22.0
2	张嗣良	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	238	2388	24.0	36.0
3	王永红	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	87	634	13.0	20.0
4	储炬	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	227	1871	22.0	29.0
5	庄英萍	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	180	1652	23.0	30.0
6	钱江潮	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	20	129	7.0	10.0
7	吕中原	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	30	1.0	1.0