甲醇利用菌MB200丝氨酸乙醛酸氨基转移酶基因(sga)的克隆、突变及对产L-丝氨酸的影响

• 作者: 武波 王亚莉 申佩弘
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 工学
• 关键词: MB200 L-丝氨酸 丝氨酸乙醛酸氨基转移酶基因 突变菌株
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: TQ46
• 字数: 3147字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2008.01.004

摘要

sga基因是大多数Methylobacterium sp.中丝氨酸循环途径里的一个关键酶基因,与单碳化合物的同化及二碳化合物的代谢有着密切的关系. 根据已报道的M.extorquens AM1的sga基因序列,合成寡核苷酸引物,用本实验室保存的甲醇利用菌M.sp. MB200的染色体DNA为模板,通过PCR方法扩增出sga基因,测序分析表明该基因与M.extorquens AM1的sga基因在核苷酸水平上有93%的同源性,氨基酸水平上具有85%的同源性.利用自杀质粒pK18mob构建含有sga基因部分片段的重组质粒,通过三亲本结合后导入原始菌株MB200中,经过进一步同源单交换, sga基因被pK18mob插入突变,利用PCR和Southern杂交进行验证, 选择发生正向突变的突变株MB200sTB用于进一步研究分析.分析结果表明突变菌株的丝氨酸乙醛酸氨基转移酶(SGAT)的酶活性消失,同时失去了在以甲醇为唯一碳源的培养基上生长的能力,不能再合成L-丝氨酸, 但仍能以二碳化合物和多碳化合物进行生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	武波		56	665	16.0	23.0
4	申佩弘		5	15	3.0	3.0
16	王亚莉		2	9	2.0	2.0