pET32a-PTEN融合质粒的构建与表达

• 作者: 庄俊华 张战锋 韩丽乔 黄宪章
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 大肠杆菌 PTEN 融合质粒
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 706-708
• 页数: 3页
• 字数: 3094字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2014.05.010

摘要

目的：构建PTEN原核融合质粒，利用原核表达体系表达PTEN蛋白。方法：从人新鲜外周血中提取总RNA，采用逆转录和聚合酶链反应等分子生物学技术扩增PTEN编码区基因，并将其pET32a质粒融合，化学法转化大肠杆菌DH5α进行克隆。将鉴定正确的pET32a-PTEN融合质粒转化入表达菌株BL21，通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导其蛋白表达，SDS-PAGE和Western-Blot鉴定蛋白表达情况。结果：菌落PCR及DNA测序证实目的基因与质粒完整融合；融合质粒成功转入表达菌株BL21（DE3），SDS-PAGE和Western-Blot结果显示表达菌经IPTG诱导后表达出73 kDa左右的蛋白。结论：成功构建融合质粒，并且PTEN全长蛋白在原核表达菌BL21中完整、高效表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄宪章	广州中医药大学第二附属医院检验科	31	157	6.0	11.0
2	庄俊华	广州中医药大学第二附属医院检验科	26	177	8.0	12.0
3	张战锋	广州中医药大学第二附属医院检验科	16	46	4.0	6.0
4	韩丽乔	广州中医药大学第二附属医院检验科	8	25	2.0	5.0