茶树细胞色素P450基因CYP71A26与CYP71B34 的克隆及差异表达特征分析

• 作者: 单睿阳 林郑和 游小妹 钟秋生 陈常颂 陈志辉
• 来源期刊: 茶叶科学
• 学科: 工学
• 关键词: 茶树 细胞色素P450 克隆 亚家族基因 胁迫 表达相反
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 页码范围: 450-460
• 页数: 11页
• 分类号: TS272.2|Q52
• 字数: 6899字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-369X.2018.05.002

摘要

利用NCBI茶树转录组数据库,以铁观音芽叶为材料,克隆了茶树细胞色素P450基因CYP71A26与CYP71B34的cDNA全长.CYP71A26与CYP71B34的cDNA全长分别为1879 bp和1764 bp,分别含有1539 bp(编码513个氨基酸)和1533 bp(编码511个氨基酸)的完整开发阅读框.氨基酸序列比对结果显示,CYP71A26与CYP71B34的同源性为42.47％,为2个亚家族基因.氨基酸结构分析表明,2个基因均具有植物P450的螺旋C(Helix C)、螺线I(Helix I)、螺线K(Helix K)、"Meander"区域序列和血红素结合域(Heme binding domain)的典型结构.进化树分析显示,CYP71A26与CYP71B34在分子进化树上分属两大分支,2个基因与其他物种亲缘关系的远近不同.三级结构模拟与功能域分析显示,CYP71A26与CYP71B34主要由N端的 β 折叠和C端的 α 螺旋结构组成,且2个基因均具有一个P450蛋白结构域(Pfam domain).荧光定量PCR结果表明,CYP71A26与CYP71B34基因在不同茶树害虫为害的叶片中,分别表现出上调和下调表达的现象.而在冷热环境下,CYP71A26与CYP71B34基因分别表现出下调和上调表达的现象.表明茶树CYP71A26与CYP71B34基因均参与了生物(害虫)与非生物(温度)的胁迫响应,但两个基因表达相反,参与环节可能相反.