嗜热芽孢杆菌CHB1环糊精酶基因优化及其在毕赤酵母中的表达

• 作者: 林新坚 林晓栩 蔡海松 邱宏端 陈济琛 陈龙军
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜热芽孢杆菌CHB1 环糊精酶 密码子优化 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 994-999
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4918字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2018.09.014

摘要

为实现新型CGTase在毕赤酵母中的高效表达,提取嗜热芽孢杆菌CHB1基因组DNA为模块,PCR扩增野生型基因CGT1,编码680个氨基酸.将该基因进行密码子优化CGT2,与野生型基因CGT1分别插入分泌型载体pPICZαA转化毕赤酵母GS115,获得两株酵母工程菌GS 115/pPICZαA-CGT1和GS 115/pPICZαA-CGT2;经甲醇诱导表达120 h后,CGT2活力达0.62U/mL,是优化前CGT1 (0.37 U/mL)活性的1.7倍;进一步对GS 115/pPICZαA-CGT2进行摇瓶发酵条件优化,确定其最优发酵条件为:pH 6.5、28℃、200 r/min、每24小时补加体积分数1.5％的甲醇诱导,120 h后其胞外酶活力达到1.26 U/mL,是优化前的两倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈济琛	福建省农业科学院土壤肥料研究所	88	786	15.0	23.0
2	林新坚	福建省农业科学院土壤肥料研究所	186	2041	26.0	33.0
3	蔡海松	福建省农业科学院土壤肥料研究所	41	318	10.0	15.0
4	邱宏端	福州大学生物科学与工程学院	58	717	16.0	25.0
5	陈龙军	福建省农业科学院土壤肥料研究所	12	21	3.0	3.0
6	林晓栩	福建省农业科学院土壤肥料研究所	2	4	1.0	2.0