产气肠杆菌B19中β-甘露聚糖酶基因的克隆表达及酶学性质研究

• 作者: 宋妍 崔堂兵
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 产气肠杆菌B19 β-甘露聚糖酶 克隆表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（13）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 142-149
• 页数: 8页
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2018.13.026

摘要

将产气肠杆菌B19中的β-甘露聚糖酶基因(ManE)进行克隆,获得全长ManE基因序列,将ManE基因与pET28a(+)表达载体连接,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建重组菌株BL21(DE3)-pET-28a(+)-ManE,并成功表达了重组β-甘露聚糖酶.结果表明:克隆得到ManE基因序列全长为2196 bp,编码731个氨基酸.通过Ni柱亲和层析法分离纯化得到纯度较高的重组β-甘露聚糖酶,其分子量大小约为82.5 ku.重组β-甘露聚糖酶的酶学性质研究结果显示:最适反应温度和最适pH分别为55℃和6.5,在温度50～55℃,pH4.0～7.0的范围内都能保持较好的稳定性.1 mmol/L浓度的Co2+、Mn2+、Zn2+、Ba2+和Ca2对重组β-甘露聚糖酶的酶活有不同程度的激活作用.而K+、Mg2+和Cu2+对该重组酶有不同程度的阻碍作用,其中Cu2+对该重组酶催化活性的抑制作用最强,酶活降低到最大酶活力的65.3％.本研究实现了β-甘露聚糖酶的异源表达,这些结果为该酶的进一步工业化应用提供了重要的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔堂兵	华南理工大学生物科学与工程学院	47	767	15.0	26.0
2	宋妍	华南理工大学生物科学与工程学院	2	2	1.0	1.0