摘要:
克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)代谢甘油合成1,3-丙二醇(1,3-propanediol,1,3-PDO)的过程中,存在乙酸溢流、TCA循环活性低的问题,影响1,3-PDO合成.该研究对K.pneumoniae中乙醛酸循环抑制因子iclR进行敲除,并过表达TCA循环中琥珀酸脱氢酶基因sdhC和苹果酸脱氢酶基因mdh,缓解乙酰辅酶A节点的碳流溢出.结果表明,敲除iclR后乙酸积累量降低了41%,1,3-PDO产量提高了8%.在K.p Lric中单独过表达sdhC或mdh基因,2,3-丁二醇产量分别降低了47%和52%,1,3-PDO产量分别提高了7%和8%.共表达sdhC和mdh基因后,菌株的甘油利用能力增强,1,3-PDO产量比K.p Lric提高了11%.5 L发酵罐分批补料发酵结果表明,K.p Lric-sdhC-mdh的生物量明显提高,1,3-PDO产量达77.2 g/L,摩尔转化率为0.69 mol/mol.以上结果表明,敲除iclR激活乙醛酸循环、过表达sdhC和mdh强化TCA循环可以弱化乙酸溢流,增强菌株的甘油利用能力,促进合成1,3-PDO.