构建基因工程菌发酵产生维生素C的前体2-酮基-L-古龙酸

• 作者: 乔春红 尹光琳 李越 陈策实 陈芳
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 化学
• 关键词: 2,5-DKG还原酶 发酵 2-KLG
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-14
• 页数: 6页
• 分类号: O6
• 字数: 3687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2000.01.003

摘要

从棒状杆菌SCB3058克隆得到两个2,5-DKG**还原酶基因后,构建了两个能够表达2,5-DKG还原酶的基因工程大肠杆菌BL21(DE3)PET9aⅡ和DH5α(pBL4)和一个基因工程欧文氏菌ER97.2,5-DKG还原酶基因分别受控于PL或T7启动子,通过加入IPTG或提高温度进行诱导,SDS-PAGE和酶活测定确定它们在诱导后得到了高表达,用细胞抽提液在加入辅酶NADPH的体外实验中转化2,5-DKG,HPLC检测证明能够产生大量2-KLG,然后在摇瓶水平上研究了它们转化2,5-DKG产生2-KLG的能力,结果表明采用合适的培养基,经过适时的诱导,它们都能够转化2,5-DKG产生2-KLG,它们的产量可能与细胞内NADPH水平、2-KLG跨膜转运以及还原2-KLG的酶水平有非常直接的关系.进一步提高产量需要对培养基和发酵条件进行优化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李越	中科院上海生物工程研究中心	4	14	3.0	3.0
2	尹光琳	中科院上海生物工程研究中心	4	22	4.0	4.0
3	乔春红	中科院上海生物工程研究中心	2	14	2.0	2.0
4	陈策实	中科院上海生物工程研究中心	1	5	1.0	1.0
5	陈芳	中科院上海生物工程研究中心	2	16	2.0	2.0