地衣芽孢杆菌YP1A耐有机溶剂蛋白酶基因的克隆与功能表达

• 作者: 何冰芳 何小丹 孙蓓蓓 李霜
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 地衣芽孢杆菌YP1A 耐有机溶剂蛋白酶 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 67-73
• 页数: 7页
• 分类号: Q812|Q78
• 字数: 3749字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1762-3678.2009.06.014

摘要

根据B. licheniformis YP1A来源的碱性蛋白酶具有的高强度耐有机溶剂性能及相关数据库分析,采用PCR克隆B. licheniformis YP1A耐有机溶剂碱性蛋白酶基因,序列分析显示该基因(1 264 bp)包含启动子与编码380个氨基酸的开放阅读框(ORF),ORF包括信号肽、前肽及编码254个氨基酸的成熟肽序列.相关基因分析表明,YP1A耐有机溶剂碱性蛋白酶基因与地衣芽孢杆菌ATCC14580的碱性蛋白酶基因仅有6个氨基酸残基差异.构建2种含YP1A碱性蛋白酶CDS的组成型穿梭表达载体pHY/aprYP与pHY/aprP43,前者采用YP1A蛋白酶自带的启动子,后者则采用来自于质粒pP43NMK的P43强启动子.利用这2种表达载体在枯草芽孢杆菌WB800中成功进行蛋白酶的功能表达,其中P43强启动子的表达能力明显优于碱性蛋白酶自带的启动子,表达的蛋白酶比酶活为395 U/mL.重组菌表达的碱性蛋白酶在体积分数50%的亲水及疏水有机溶剂中表现出了很好的耐受性,验证了克隆基因为地衣芽孢杆菌YP1A的高强度耐有机溶剂碱性蛋白酶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李霜	南京工业大学制药与生命科学学院	87	705	13.0	22.0
2	何冰芳	南京工业大学制药与生命科学学院	91	785	14.0	24.0
3	何小丹	南京工业大学制药与生命科学学院	3	13	2.0	3.0
4	孙蓓蓓	南京工业大学制药与生命科学学院	2	10	2.0	2.0