嗜热踝节菌脂肪酶（TTL）的重组表达及催化合成普瑞巴林手性中间体

• 作者: 吴欣玮 郑仁朝 郑裕国
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜热踝节菌 脂肪酶 低温表达 酶学性质 普瑞巴林
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 37-44
• 页数: 8页
• 分类号: Q936
• 字数: 5613字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2016.05.008

摘要

以催化合成普瑞巴林中间体（3S）2羧乙基3氰基5甲基己酸为目标，通过基因挖掘得到来源为嗜热踝节菌的脂肪酶氨基酸序列，构建了基因工程菌 Escherichia coli BL21／pET28b TTL，在16℃成功诱导表达了嗜热踝节菌脂肪酶TTL。分离纯化得到TTL电泳纯酶，其最适反应温度为50℃，在50℃的半衰期为14．5 d，表明TTL具有良好的热稳定性；TTL最适pH为8．0，在pH 7．0～8．5时稳定性好。 TTL在50℃、pH 8．0条件下，催化100 mmol／L外消旋2羧乙基3氰基5甲基己酸乙酯水解转化率达42％以上，产物的对映体过量值（ e． e．值）＞94％。这表明TTL在化学酶法合成普瑞巴林中具有较大应用潜力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑裕国	浙江工业大学生物工程学院	182	1210	17.0	26.0
2	郑仁朝	浙江工业大学生物工程学院	26	97	5.0	9.0
3	吴欣玮	浙江工业大学生物工程学院	1	1	1.0	1.0