布氏锥虫来源内切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶的异源表达和活性鉴定

• 作者: 中西秀树 喜多岛敏彦 崔娟 王宁 高晓冬
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 内切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶 转糖基作用 布氏锥虫 Nus-Endo Tb
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 8-13
• 页数: 6页
• 字数: 4814字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.016879

摘要

内切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶(Endo-β-N-acetylglucosaminidase,ENGase)是一类可以水解N-糖链中核心壳二糖之间β-1,4-糖苷键的糖苷内切酶,其中糖苷水解酶85家族(glycoside hydrolasefamilies 85,GH85)的ENGase除了水解活性之外还具有转糖基活性,能够以切除后再将均一的寡糖链转移到N-糖蛋白的β-N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)上的方式,改造医药糖蛋白的N-糖基化修饰.通过数据库检索,在布氏锥虫(Trypanosoma brucei)的基因组中找到了GH85家族ENGase的同源序列,并命名为Endo-Tb基因,对其克隆后在带有Nus融合蛋白的原核(E.coli)表达载体上成功表达并纯化.检测到融合蛋白Nus-Endo Tb能够水解高甘露糖型和双天线的复合型糖链,但不能作用于三天线的复合型糖链.同时Nus-Endo Tb可以水解核糖核酸酶B和人类转铁蛋白上的N糖链.当用唾液酸糖肽(SGP)作为糖基供体,MU-GlcNAc作为糖基受体时,通过荧光基质底物四甲基伞形酮(MU)检测到Nus-Endo Tb具有转糖基活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宁	江南大学生物工程学院	13	31	4.0	5.0
2	高晓冬	江南大学生物工程学院	39	30	3.0	4.0
3	中西秀树	江南大学生物工程学院	26	27	3.0	4.0
4	喜多岛敏彦	江南大学生物工程学院	5	0	0.0	0.0
5	崔娟	江南大学生物工程学院	2	1	1.0	1.0