甘油激酶的表达纯化及在酮糖合成中的应用

• 作者: 中西秀树 吴晓茹 李子杰 高晓冬
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 甘油激酶 醛缩酶 磷酸二羟基丙酮 一釜多酶法 酮糖
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 817-823
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 字数: 5251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2018.08.006

摘要

研究了大肠杆菌MG1655来源的甘油激酶(GK)的表达及其在酮糖合成中的应用.本研究从大肠杆菌MG1655扩增了甘油激酶的基因片段glpK,连接到表达载体pET-28a上,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱纯化目的蛋白.利用该甘油激.酶可以催化成本较低的底物甘油生成L-3-磷酸甘油,再经过磷酸甘油氧化酶(GPO)的催化生成磷酸二羟基丙酮(DHAP),生成的DHAP可以在不同的DHAP依赖性醛缩酶的催化下与受体D-甘油醛合成酮糖-1-磷酸,最终用酸性磷酸酶脱掉磷酸生成一系列酮糖.结果表明,该酶成功地用于“一釜多酶法”合成体系中,以便宜的底物甘油为前体,合成出包括稀有糖在内的一系列酮糖,生成的产物、产率及比例用TLC、HPLC进行检测.该方法的建立将为其他稀有糖及其衍生物的合成提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高晓冬	江南大学生物工程学院	39	30	3.0	4.0
2	李子杰	江南大学生物工程学院	21	18	3.0	3.0
3	中西秀树	江南大学生物工程学院	26	27	3.0	4.0
4	吴晓茹	江南大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0