spoIIE基因缺失对克劳氏芽孢杆菌淀粉酶酶活的影响

• 作者: 原梨萍 张虎 汪俊卿 王瑞明 肖静
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 克劳氏芽孢杆菌 spoIIE基因 基因敲除 芽孢生成率 生物量 淀粉酶
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 131-135,268
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.2+5
• 字数: 5370字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.01.025

摘要

通过对克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)QL-l spoIIE基因敲除,研究了其对菌体芽孢形成、生物量以及淀粉酶酶活的影响.将重叠的spoIIE-Cm'片段电转化至B.clausii QL-1感受态细胞,仅通过一次同源单交换实现对spoIIE基因快速敲除,成功获得spoIIE基因缺失菌株B.clausii QL-1 AspoIIE.发酵培养B.clausii QL-1△SpollE与出发菌株相比,B.clausii QL-1AspoIIE芽孢生成率28 h降低为0.48％,20 h生物量提高了20％,84 h淀粉酶酶活是出发菌株的5.58倍,通过补料发酵B.clausii QL-1 AspoIIE菌株80 h最大生物量达到7.2 mg·mL1,84 h淀粉酶酶活达到690 U.mL-1,较未补料前提高了33.30％.经验证spoIIE基因为B.clausii QL-1芽孢形成关键基因,同时它的缺失有利于淀粉酶酶活的提高,这对后续构建芽孢杆菌类高产淀粉酶工业生产菌株具有重要意义.