新型耐热耐酸普鲁兰酶的分离纯化与酶学特性分析

• 作者: 尚业成 李宝林 焦魏 王先凤 芦宁 许祥 陈雪莲 高兆建
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 普鲁兰酶 泡盛曲霉XF 分离纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究与探讨
• 页码范围: 75-81
• 页数: 7页
• 分类号: TS201
• 字数: 6663字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.04.012

摘要

从泡盛曲霉(Aspergillus awamori)XF发酵液中分离纯化普鲁兰酶(PulXF)并研究其酶学性质.通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和疏水层析,纯化得到一种电泳纯的PulXF.纯化倍数8.16倍,比活力为309.28 U/mg.SDS-PAGE检测得单条带,表明PulXF为单亚基蛋白,分子量63.7 kDa.在50～80℃,pH4.5～8.0范围内,酶能保持高活性,最适反应温度60℃,最适pH5.0.在较广的pH范围内(pH3.0～8.0),28℃下,经过24 h酶活能保持80％以上活性.Km值和Vmax分别为0.92 mg/mL和11.90 μmol/min.酶活测定及TLC分析显示PulXF对普鲁兰多糖有强水解活性,终产物麦芽三糖;对支链淀粉和可溶性淀粉有较弱活性,对直链淀粉、α-环糊精、β-环糊精和糖原无活性.表明从泡盛曲霉XF分离的PulXF属于Ⅰ型普鲁兰酶.Ca2+、ZB2+和Mg2+能够促进酶的活性,其中Ca2+激活作用最强.而PulXF在5％浓度的SDS、CTAB、Tween 80和30％的乙醇中保持高稳定性.基于PulXF在苛刻环境下的高稳定性及高活性,很有希望在淀粉加工、食品饮料等领域以及需要在高温、高酸环境下使用的生物技术工业中使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宝林		4	14	1.0	3.0
2	焦魏		3	1	1.0	1.0