蜡样芽孢杆菌特异性基因筛选及聚合酶链式反应检测方法的建立

• 作者: 周威 崔震昆 张浩 王书彦 王书贤 王淼焱 赵圣明 赵岩岩 赵琳琳 赵璐
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 蜡样芽孢杆菌 特异性基因 筛选 聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 分析与检测
• 页码范围: 271-277
• 页数: 7页
• 字数: 4996字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023146

摘要

该研究以蜡样芽孢杆菌ATCC 14579的基因组为模板,利用比较基因组学方法筛选并通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证获得3个蜡样芽孢杆菌的特异性基因,用于食品中蜡样芽孢杆菌的快速检测,并对引物的特异性、灵敏度、抗干扰能力和人工污染检测限等进行评价.结果表明,筛选获得的3个基因片段特异性较好.其中以gene_2626设计的引物gFA2特异性最好,检测灵敏度可达359.5 fg/μL.抗干扰评价结果表明在牛肉背景菌群浓度5.28×107 CFU/mL和猪肉背景菌群浓度7.75×106 CFU/mL的干扰下,蜡样芽孢杆菌的最低检出限为3.74×103 CFU/mL.人工污染试验结果表明,蜡样芽孢杆菌经增菌培养10 h后,人工污染的牛肉和猪肉样品中蜡样芽孢杆菌的检出限分别为4.62和8.38 CFU/g.因此该研究筛选的特异性基因及建立的PCR检测方法在食品中蜡样芽孢杆菌的快速检测方面具有一定的应用潜力.