Streptoverticillium mobaraense谷氨酰胺转胺酶的表达、纯化和复性

• 作者: 唐名山 李华钟 王树英 陈坚
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 学科: 工学
• 关键词: 谷氨酰胺转胺酶 Streptoverticillium mobaraense,大肠杆菌 纯化 复性
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: TQ92
• 字数: 3377字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-990X.2004.04.004

摘要

以基因组DNA为模板,利用PCR技术从茂原轮链丝菌(Streptoverticillium mobaraense)中扩增得到产成熟谷氨酰胺转胺酶MTG的结构基因mtg,克隆于表达载体pQE-30T,构建成lac启动子控制下的His6融合表达质粒pMTG,将此重组质粒转化到受体菌E.coli M15 中.对质粒稳定性的研究表明,E.coli M15 在无选择压的情况下,于37℃连续转接5次,质粒丢失率仅有24%,说明质粒基本稳定.重组菌经IPTG诱导,表达的重组谷氨酰胺转胺酶占菌体总蛋白的18%,经SDS-PAGE分析,表达的蛋白质的分子质量为38 ku,与预期分子质量相符.表达产物主要以包涵体的形式存在.细胞经超声破碎,离心取包涵体溶于8 mol/L的尿素中,然后通过Ni-NTA亲和柱分离纯化和稀释法复性.目的蛋白的纯度可达95%以上.比酶活为10.3U/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈坚	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	447	6664	38.0	58.0
2	李华钟	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	63	592	13.0	22.0
3	王树英	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	17	201	9.0	13.0
4	唐名山	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	16	1.0	1.0