His-tag对胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中表达的影响

• 作者: 张玲 杨海麟 王武 程晨 辛瑜
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 组氨酸标签 胆固醇氧化酶 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 29-34
• 页数: 6页
• 字数: 3560字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2012.05.006

摘要

为考察组氨酸标签(His-tag)对Brevibacterium sp.DGCDC-82中胆固醇氧化酶基因(ChoAb)在大肠杆菌中表达的影响,将PCR扩增后得到的结构基因与pET28a(+)连接,构建重组质粒pETChoAb(不带His-tag),pETChoAbn(His-tag位于N端)和pETChoAbc(His-tag位于C端)并在大肠杆菌中进行表达.对重组酶进行酶活检测,结果表明His-tag位于ChoAb的C端和N端,COD单位体积酶活由未带标签时的1.72 U/mL分别提高到4.03 U/mL和11.36 U/mL.利用软件Quantity One对SDS-PAGE电泳条带进行灰度分析,结果显示与不带His-tag的COD相比,His-tag位于ChoAb的C端和N端,COD表达量由8.8％增加到16.4％与72.3％.同时菌体浓度分别提高了1.2倍和3.2倍.作为纯化标签,该研究结果对His-tag用于诊断用酶COD的分离纯化可以提供一定的理论指导.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王武	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	124	898	16.0	22.0
2	杨海麟	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	104	690	14.0	20.0
3	张玲	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	66	239	8.0	12.0
4	辛瑜	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	24	36	4.0	4.0
5	程晨	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	3	7	1.0	2.0