重组大肠杆菌生产硫磺矿硫化叶菌β-半乳糖苷酶发酵条件初步研究

• 作者: 吴敬 吴玉飞 张帆 钱磊 陈晟
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: β-半乳糖苷酶 重组大肠杆菌 发酵优化
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 47-52
• 页数: 6页
• 字数: 3547字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2012.06.009

摘要

为了实现来源于S.solfataricus的β-半乳糖苷酶的高效表达,对E.coli BL21 (DE3)/pT7-7-lacS基因工程菌的发酵培养基进行优化,获得最优的发酵培养基为:甘油浓度为10 g/L,蛋白胨浓度为18 g/L,酵母膏浓度为18 g/L,磷酸盐浓度为15 mmol/L,Mg2+离子浓度为5 mmol/L,乳糖诱导浓度为5 g/L.在优化条件下,β-半乳糖苷酶的酶活由初始的43.0 U/mL提高到83.4 U/mL.在此基础上,在3L发酵罐上进行了初步放大,于OD600 50时开始流加乳糖诱导,最终酶活达172.4U/mL,为摇瓶水平的2倍,为β-半乳糖苷酶的工业化生产奠定基础.