β-1,4-葡聚糖内切酶基因在大肠杆菌中分泌表达

• 作者: T.Desta 刘秦华 李君风 李湘玉 王思然 白云峰 白晰 董志浩 邵涛
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 瑞氏木霉 β-1,4-葡聚糖内切酶 大肠杆菌 分泌表达
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 309-315
• 页数: 7页
• 分类号: S816.53
• 字数: 4714字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2018.03.013

摘要

采用重叠延伸PCR合成技术将乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)分泌蛋白基因序列usp45(81 bp)和瑞氏木霉(Trichoderma reesei)β-1,4-葡聚糖内切酶成熟蛋白序列egl3 (657 bp)连接成融合基因usp45-egl3,构建了分泌型重组质粒pMG36e-usp45-egl3及重组大肠杆菌E.coli DH5α/pMG 36e-usp4 5-egl3.分析重组大肠杆菌的表达效果及表达产物降解纤维素的能力.结果表明,重组大肠杆菌DH5α/pMG36e-usp45-egl3经14 h培养能分泌酶活为226 mU/mL的β-1,4-葡聚糖内切酶,并有效地降解了羧甲基纤维素钠.其中分泌的β-1,4-葡聚糖内切酶降解羧甲基纤维素钠生成还原糖的速率为2.35 mg/(h· mL).