耐有机溶剂蛋白酶产生菌MSP05的筛选、鉴定及酶学性质研究

• 作者: 刘姝 张春光 房耀维 来蒋丽 杭加豪 柴金龙 胡晟源 顾张慧
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 耐有机溶剂蛋白酶 解淀粉芽孢杆菌 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（21）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 103-107,113
• 页数: 6页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2018.21.019

摘要

目的:从燕尾港受污染海域筛选耐有机溶剂蛋白酶产生菌,确定该菌的分类地位,并对其所产溶剂稳定性蛋白酶的酶学性质进行研究.方法:通过在培养基中添加20％ (V/V)甲苯作为筛选压力,筛选耐有机溶剂极端微生物,通过产蛋白酶筛选培养基筛选产蛋白酶的菌株,并利用摇瓶发酵进行复筛,最后对产酶菌株进行鉴定并对粗酶的性质进行测定.结果:筛选获得耐有机溶剂蛋白酶产生菌MSP05,结合16S rDNA序列分析、形态学观察和生理生化性质将其鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).该酶的最适反应温度和pH分别为50 ℃和10.0,Cu2、Mn2对酶有激活作用,Mg2+、Fe3+和Ba2+对酶具有抑制作用.在50％乙醇中,25℃、140 r/min振荡72 h后仍能保持50％以上酶活力.结论:分离获得耐有机溶剂蛋白酶产生菌解淀粉芽孢杆菌菌株MSP05,对有机溶剂具有较好的耐受性,具有潜在的工业应用价值.