圆弧青霉脂肪酶基因的克隆和表达

• 作者: 孙崇荣 朱吉 邬敏辰 黄伟达
• 来源期刊: 无锡轻工大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 圆弧青霉PG37 碱性脂肪酶 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 页码范围: 218-223
• 页数: 6页
• 分类号: Q93-3
• 字数: 5038字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-1689.2002.03.001

摘要

圆弧青霉PG37总RNA甲醛变性电泳呈现真核生物所特有的28S rRNA和18S rRNA条带.根据PG37所产碱性脂肪酶(Lip PC) N末端氨基酸残基序列和真核生物mRNA在3'端具有poly(A)等所提供的生物信息,采用RT-PCR技术扩增了Lip PC成熟肽和3'非编码区的cDNA片段,并将该PCR产物直接克隆至pUCm-T载体中.序列分析表明,Lip PC含有258个氨基酸残基,其中保守的五肽序列为Gly-His-Ser-Leu-Gly.进一步采用ClonTech公司的SmartTM PCR cDNA文库构建试剂盒,扩增、克隆和测定了自转录起始点至编码区的cDNA片段,从而完成了Lip PC完整cDNA的分析测定.最后将编码完整脂肪酶蛋白质的cDNA克隆至pGEX-5X-3表达载体中,SDS-PAGE检测结果表明,大肠杆菌BL21所表达的GST-Lip PC融合蛋白质分子质量约为53 ku.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬敏辰	江南大学医学系	163	1504	22.0	29.0
2	黄伟达	复旦大学生命科学学院	57	398	13.0	15.0
3	孙崇荣	复旦大学生命科学学院	16	180	8.0	13.0
4	朱吉	江南大学医学系	2	21	2.0	2.0