Pseudomonas putida S1海藻糖合成酶表达质粒的构建及诱导条件优化

• 作者: 史仲平 姚林 段作营 毛忠贵
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: Pseudomonoz puada 海藻糖合成酶 克隆 表达 诱导条件
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 44-49
• 页数: 6页
• 分类号: Q93
• 字数: 3143字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2008.05.010

摘要

采用PCR方法从Pseudomonas putida S1中克隆出编码海藻糖合成酶的基因treS,并与质粒pQE30T相连,构建了表达质粒pQE-TS2.将此重组质粒转化宿主茵E coli M15进行诱导表达.十二烷基磺酸钠.聚丙烯酰胺凝胶SDS-PAGE电泳结果表明,treS基因在大肠杆菌中获得了高效表达.通过对诱导温度、诱导荆浓度、加诱导荆时间和诱导时间的优化研究,在茵液生长至OD600值为0.6时,加入诱导剂IPTG至终浓度0.01mmol/L,20℃诱导20h,蛋白的表达量达到每克干细胞89mg的蛋白,粗酶液酶活达到19U/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段作营	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	84	674	14.0	21.0
2	毛忠贵	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	175	1381	18.0	29.0
3	史仲平	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	52	251	8.0	12.0
4	姚林	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	2	7	2.0	2.0