TRAIL蛋白的体外活性稳定性初步研究

• 作者: 周劲松 周文瑜 孙菁 张国钧 张红 沈亚领 球谊 陶欣艺 魏东芝
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 生物学
• 关键词: TRAIL 纯化 Zn2+ L-Arg L-Glu 蛋白稳定性
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 9-14
• 分类号: Q93
• 字数: 5045字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2011.01.003

摘要

大肠杆菌发酵表达的TRAIL蛋白经过两步纯化可得到纯度95%以上的活性蛋白,得率为40%.天然TRAIL蛋白为同源三聚体形式,在三聚体中心隐蔽结合Zn<'2+>,Zn<'2+>可维持TRAIL蛋白天然结构的稳定性.研究发现在纯化后的重组可溶性TRAIL蛋白中添加Zn<'2+>,并且Zn<'2+>与TRAIL单体的摩尔比例达到2:1时,TRAIL蛋白的活性达到最高.本文初步研究了TRAIL蛋白的体外活性稳定性问题,发现在添加了最适Zn<'2+>后的TRAIL蛋白保存溶液中添加25 mmol/L L-Arg与50 mmol/L L-GIu有助于抑制TRAIL蛋白活性下降、并可能长期稳定蛋白活性.